تولید ایمونوگلوبین زرده تخم مرغ (igy) برعلیه پروتئین نوترکیب ژن invgاز سالمونلا انتریکا

سالمونلا یک باکتری گرم منفی، بی هوازی اختیاری و تاژکدار است که در جنس سالمونلا و در خانواده انتروباکتریاسه قرار دارد که یکی از بیماریهای مهم عفونی و به عنوان یک بیماری مشترک در انسان و حیوانات شناخته شده است. در سالهای اخیر، انواع مختلفی از آنتی بیوتیک ها برای مقابله با سالمونلا استفاده شده است که با افزایش تعداد باکترهای مقاوم به آنتی بیوتیک، استفاده از روش های جایگزین ضروری به نظر می رسد. هدف از انجام این مطالعه تولید پروتئین نوترکیب invg به منظور استفاده از آن در ایجاد ایمنی بر علیه باکتری سالمونلا بود، این پروتئین یکی از عوامل آنتی ژنیک اصلی برای ایجاد بیماری سالمونلازیس است. این ویژگی invg ثابت می کند که استفاده از این ژن به عنوان یک زیر واحد برای تولید پروتئین نوترکیب جهت تحریک سیستم ایمنی مناسب می باشد. ژن invg از سالمونلا انتریکا با استفاده از واکنش زنجیره پلیمراز و آغازگرهای اختصاصی حاوی مکان های برشی bamhi و xhoi تکثیر و جداسازی شد. به منظور بررسی خصوصیات نوکلئوتیدی، ژن تکثیر شده به ناقل کلونینگ ptz57r/t انتقال و حضور ژن هدف در این ناقل با استفاده از روش های کلونی pcr، هضم آنزیمی و توالی یابی تایید شد. به منظور تولید آنتی ژن نوترکیب، ژن هدف به ناقل بیانی (+)pet32a وارد و سپس به باکتری اشریشیاکلی سویه (bl21(de3 به عنوان میزبان بیان منتقل شد. باکتری حاوی ناقل نوترکیب با استفاده از iptg در غلظت نهایی5/1 میلی مولار القاء شد. تولید پروتئین نوترکیب با وزن تقریبی 81 کیلو دالتون به روش آنالیز sds-page و وسترن بلاتینگ تایید شد. نتایج الایزا نشان داد که مرغ های ایمن شده با آنتی ژن invg واکنش ایمنی قابل توجهی به آن نشان دادن و سطح بالایی از igy اختصاصی علیه آن تولید کردند. در نهایت، نتایج نشان دهنده موفقیت تولید آنتی ژن نوترکیب و ایجاد مقدار مناسب آنتی بادی اختصاصی علیه این آنتی ژن در تخم مرغ مرغ های تخمگذار بود. کلید واژه ها: ایمونوگلوبینy، ایمنی زایی، پروتئین نوترکیب، ژن invg ، سالمونلا